Δημοσιεύθηκε την Σχολιάστε

Αλκοολική Ζύμωση – Η 2η ζύμωση πού μάς ενδιαφέρει

πρωτοσέλιδο - Αλκοολική Ζύμωση – Η 2η ζύμωση που μας ενδιαφέρει

Τί είναι η αλκοολική ζύμωση? Ποιά είναι η σημασία της αλκοολικής ζύμωσης στην παραγωγή των γαλακτοκομικών προϊόντων?

Τί είναι η Αλκοολική ζύμωση?

Γενικά, η αλκοολική ζύμωση είναι μια πολύπλοκη βιοτεχνολογική διαδικασία.

Κατά την διεργασία της αλκοολικής ζύμωσης, σάκχαρα, (C6H12O6), όπως, είναι, η γλυκόζη, η σακχαρόζη, και η φρουκτόζη ζυμώνονται, με αποτέλεσμα, την παραγωγή αιθανόλης, (CH3CH2OH), και διοξειδίου του άνθρακα, (CO2), αλλά, και άλλων προϊόντων.

Γιαούρτι. Το τελικό προϊόν είναι πιθανόν να περιέχει μικροποσότητες αλκοόλης. Τα δύο οξυγαλακτικά βακτήρια (Streptococcus thermophillus και Lactobacillus bulgaricus) είναι ομοιοζυμωτικά. Ωστόσο, υπάρχει περίπτωση η ζύμωση της λακτόζης να δημιουργεί και άλλα μεταβολικά προϊόντα, εκτός του γαλακτικού οξέος.

Η αλκοολική ζύμωση μπορεί να παρουσιαστεί, με απλοποιημένο τρόπο, με την αντίδραση:

C6H12O6 → 2 CH3CH2OH +   2CO2

Η αλκοολική ζύμωση είναι η 2η ζύμωση, η οποία, εμάς, μάς ενδιαφέρει.

Δείτε: Μάθε ποιά είναι τα 7 είδη ζύμωσης στα γαλακτοκομικά προϊόντα

Μικροβιακές καλλιέργειες εκκίνησης (starter cultures) για την παρασκευή μπύρας. Αυτές οι καλλιέργειες μπορεί να περιέχουν ζυμομύκητες οι οποίοι έχουν την ικανότητα να ζυμώνουν την λακτόζη του γάλακτος και να παράγουν αιθανόλη και CO2. Εγώ μπορώ να χρησιμοποιήσω τέτοιες καλλιέργειες για να φτιάξω ιδιαίτερα γαλακτοκομικά προϊόντα? Με ποιό τρόπο αυτοί οι ζυμομύκητες μπορούν να προωθήσουν την αλκοολική ζύμωση στην παρασκευαστική διαδικασία?

Η αλκοολική ζύμωση μπορεί να θεωρηθεί ότι αποτελείται από δύο τμήματα.

Αλκοολική ζύμωση στα γαλακτοκομικά προϊόντα – 1ο τμήμα αλκοολικής ζύμωσης – Γλυκόλυση (τα σάκχαρα μετατρέπονται σε πυροσταφυλικό οξύ)

Το 1ο τμήμα περιλαμβάνει την αποικοδόμηση της γλυκόζης σε πυροσταφυλικό-πυρουβικό οξύ.

Αυτή, η διεργασία ονομάζεται Γλυκόλυση.

Μεταβολική οδός της Γλυκόλυσης. Η λακτόζη διασπάται σε γλυκόζη και σε γαλακτόζη. Η γλυκόζη μεταβολίζεται σε πυροσταφυλικό οξύ. Αυτή η μεταβολική οδός αναφέρεται και ως οδό Embden–Meyerhof–Parnas (EMP). Τόσο οι ζυμομύκητες (π.χ. Saccharomyces cerevisiae) όσο και τα ομοιοζυμωτικά οξυγαλακτικά βακτήρια (π.χ. Lactococcus lactis, Lactobacillus spp.) χρησιμοποιούν αυτήν την μεταβολική οδό. Υπάρχει η ίδια ενεργειακή απόδοση (2 ATP ανά μόριο γλυκόζης), το ίδιο τελικό προϊόν (πυροσταφυλικό οξύ) και επίσης η γενική ροή ενζυμικών αντιδράσεων είναι παρόμοια.

Η αντίδραση είναι: C6H12O6 + 2 ADP + 2 Pi + 2 NAD+ → 2 CH3COCOO (πυροσταφυλικό οξύ) + 2 ATP + 2 NADH + 2 H2O + 2 H+

2ο τμήμα αλκοολικής ζύμωσης – Το πυροσταφυλικό οξύ μετατρέπεται σε αιθανόλη

Το 2ο τμήμα περιλαμβάνει την μετατροπή του πυροσταφυλικού οξέος σε αιθανόλη.

Η μετατροπή του πυροσταφυλικού οξέος σε αιθανόλη προχωρά σε δύο στάδια.

Τα ομοιοζυμωτικά οξυγαλακτικά βακτήρια εκτελούν την  ομοιοζυμωτική οξυγαλακτική ζύμωση.  Η γλυκόζη υπόκειται σε μιά σειρά βιοχημικών αντιδράσεων και μετατρέπεται σε πυροσταφυλικό οξύ. Στη συνέχεια, το πυροσταφυλικό οξύ μετατρέπεται σε ποσοστό άνω του 90% (ίσως και 99%) σε γαλακτικό οξύ. Ωστόσο, όταν αυτοί οι μικροοργανισμοί βρίσκονται σε συνθήκες στρές, τότε ο μεταβολισμός της γλυκόζης περιλαμβάνει σε μεγαλύτερο ποσοστό και άλλα μεταβολικά μονοπάτια. Έτσι, όταν αυτοί οι ομοιοζυμωτικοί μικροοργανισμοί βρίσκονται σε συνθήκες στρές, τότε το πυροσταφυλικό οξύ μπορεί να μεταβολίζεται σε Acetyl – CoA με την παράλληλη απελευθέρωση φορμικού οξέος ή CO2. Το Acetyl – CoA μπορεί να μετατραπεί σε ακεταλδεΰδη και αργότερα σε αιθανόλη. Επίσης, το Acetyl – CoA μπορεί να μετατραπεί σε οξικό οξύ (μέσω acetylphosphate). Συνεπώς, ακόμα και τα ομοιοζυμωτικά οξυγαλακτικά βακτήρια μπορούν να παράξουν μικροποσότητες αιθανόλης.  
—1ο στάδιο Το πυροσταφυλικό οξύ μετατρέπεται σε ακεταλδεΰδη

Σε αυτό, το 1ο στάδιο, το πυροσταφυλικό οξύ μετατρέπεται σε ακεταλδεΰδη με την ταυτόγχρονη παραγωγή διοξειδίου του άνθρακα (CO2).

CH3COCOO (πυρουβικό οξύ) + H+ → CH3CHO (ακεταλδεΰδη) + CO2

Το ένζυμο αποκαρβοξυλάση του πυροσταφυλικού οξέος (pyruvate decarboxylase) αποτελεί τον καταλύτη, για αυτήν, την αντίδραση.

Οι ζυμομύκητες (yeasts) ζυμώνουν την γλυκόζη μέσω της γλυκολυτικής οδού (glycolysis) και παράγουν πυροσταφυλικό οξύ. Σε αντίθεση με τα οξυγαλακτικά βακτήρια, οι ζυμομύκητες μετατρέπουν απευθείας το πυροσταφυλικό οξύ προς ακεταλδεΰδη. Το πυροσταφυλικό οξύ αποκαρβοξυλιώνεται και μετατρέπεται σε ακεταλδεΰδη με την βοήθεια του ενζύμου αποκαρβοξυλάση του πυρουβικού οξέος (pyruvate decarboxylase). Η ακεταλδεΰδη ανάγεται σε αιθανόλη με την βοήθεια του ενζύμου της αλκοολικής αφυδρογονάσης (alcohol dehydrogenase). 

Αυτό, το ένζυμο, παίζει σημαντικό ρόλο, όταν, κατά την αλκοολική ζύμωση, επικρατούν αναερόβιες συνθήκες, ιδιαίτερα, δε, όταν, στην αλκοολική ζύμωση συμμετέχουν και ζυμομύκητες, οι οποίοι ανήκουν στο γένος Saccharomyces.

—2ο στάδιο Η ακεταλδεΰδη μετατρέπεται σε αιθανόλη

Σε αυτό, το 2ο στάδιο, η ακεταλδεΰδη μετατρέπεται (ανάγεται) σε αιθανόλη.

CH3CHO (ακεταλδεΰδη) + NADH + H+ → C2H5OH (αιθανόλη) + NAD+

Αλκοολική Ζύμωση – Η 2η ζύμωση η οποία μάς ενδιαφέρει
Εγώ θέλω να φτιάξω ένα ποτό κεφίρ με αυξημένη την περιεκτικότητα σε αλκοόλη. Σε ποιά θερμοκρασία να αποθηκεύσω το ποτό κεφίρ? Να σφραγίσω το δοχείο? Τί άλλο εγώ θα πρέπει να κάνω?

Το ένζυμο της αλκοολικής αφυδρογονάσης (alcohol dehydrogenase), αποτελεί τον καταλύτη, για αυτήν, την αντίδραση.

Συνολικά, η αλκοολική ζύμωση μπορί να περιγραφεί με την απλοποιημένη αντίδραση:

Glucose + 2ADP + 2Pi →  2Ethanol + 2CO2 + 2ATP

Αλκοολική ζύμωση και ζυμομύκητες στα γαλακτοκομικά προϊόντα
Αλκοολική Ζύμωση – Η 2η ζύμωση η οποία μάς ενδιαφέρει
Το αυθεντικό ποτό κεφίρ περιέχει βακτήρια, τα οποία παράγουν εξωπολυσακχαρίτες.
Ποτό κεφίρ και σπόροι του κεφίρ. Οι ζυμομύκητες, οι οποίοι έχουν το ένζυμο της β-γαλακτοσιδάσης, (β-galactosidase), και το ένζυμο της περμεάσης της λακτόζης (lactose permease), μπορούν, απευθείας να μεταβολίσουν την λακτόζη του γάλακτος. Παράδειγμα, αποτελούν τα Είδη Kluyveromyces fragilis, Kluyveromyces marxianus, και Candida pseudotropicalis. Τί γίνεται, όμως, με το Είδος Saccharomyces cerevisiae, το οποίο έχει ταυτιστεί με την, ίδια, την αλκοολική ζύμωση? Α) τα άγρια στελέχη (strains) του Saccharomyces cerevisiae δεν μπορούν να ζυμώσουν, απευθείας, την λακτόζη, του γάλακτος, λόγω έλλειψης του ενζύμου της β-γαλακτοσιδάσης. Β) Μέσω, της γενετικής μηχανικής έχουν κατασκευαστεί στελέχη του Είδους Saccharomyces cerevisiae, τα οποία μπορούν, απευθείας, να ζυμώσουν την λακτόζη του γάλακτος.

Συνήθως, όταν, λέμε αλκοολική ζύμωση, εμείς εννοούμε την παραγωγή αιθανόλης, από ζυμομύκητες, μέσω της ζύμωσης, των σακχάρων, του γάλακτος.

Τί θα πρέπει να θυμάμαι για τους ζυμομύκητες?

Οι ζυμομύκητες, οι οποίοι θα βρεθούν σε γαλακτοκομικά προϊόντα, (όπως είναι το κεφίρ),  έχουν την ικανότητα να ζυμώνουν την λακτόζη του γάλακτος, (Kluyveromyces spp.) ή μπορεί να μην έχουν την ικανότητα να ζυμώνουν την λακτόζη του γάλακτος, (Saccharomyces spp.)

Δείτε: Ζυμομύκητες στο ποτό κεφίρ – Ο πλέον κρίσιμος παράγοντας

Αλκοολική Ζύμωση – Η 2η ζύμωση η οποία μάς ενδιαφέρει
Οι ζυμομύκητες εκτός, από την αιθανόλη παράγουν και πληθώρα άλλων αρωματικών προϊόντων.

Οι ζυμομύκητες είναι, ουσιαστικά, αερόβιοι μικροοργανισμοί.

Όμως, οι ζυμομύκητες μπορούν επίσης να αναπτυχθούν και ως προαιρετικά αναερόβιοι.

Η ενέργεια, η οποία παράγεται υπό αναερόβιες συνθήκες, είναι πολύ μικρότερη, και επομένως, η ανάπτυξη, αυτών, των μικροοργανισμών είναι βραδύτερη.

Όταν επικρατούν αερόβιες συνθήκες, ο πολλαπλασιασμός των ζυμομυκήτων αυξάνεται σημαντικά, αλλά, η παραγωγή αλκοόλης ελαττώνεται.

Αλκοολική Ζύμωση – Η 2η ζύμωση η οποία μάς ενδιαφέρει
Ετεροζυμωτική οξυγαλακτική ζύμωση. Στην ετεροζυμωτική οξυγαλακτική ζύμωση, εκτός από γαλακτικό οξύ θα παραχθούν και άλλα προϊόντα μεταβολισμού όπως είναι το οξικό οξύ, το διοξείδιο του άνθρακα και η αιθανόλη. Όπως και στην περίπτωση της ομοιοζυμωτικής ζύμωσης η παραγωγή αλκοόλης δεν σημαίνει ότι αυτή η ζύμωση είναι αλκοολική. Οι αριθμοί με κόκκινο χρώμα απεικονίζουν τα ένζυμα τα οποία συμμετέχουν.  1. Hexokinase, 2. Glucose 6-phosphate dehydrogenase, 3. Phosphogluconate dehydrogenase, 4. Phosphopentose epimerase, 5. Phosphoketolase, 6. Acetate kinase, 7. Phosphate acetyltransferase, 8. Pyruvate decarboxylase, 9. Alcohol dehydrogenase, 10. Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase, 11. phosphoglycerate kinase, 12. Phosphoglyceramutase, 13. Enolase, 14. Pyruvate kinase, 15. Lactate dehydrogenase.

Συνεπώς, η παρουσία, του οξυγόνου, αναστέλλει τη αλκοολική ζύμωση (επίδραση Pasteur).

Βακτήρια και αλκοολική ζύμωση

Πέρα όμως από τους ζυμομύκητες, και μερικά βακτήρια μπορούν επίσης να πραγματοποιήσουν αλκοολική ζύμωση.

Ένα πολύ γνωστό παράδειγμα είναι το Είδος Zymomonas mobilis και το Είδος Pseudomonas saccharophila (Zymomonas mobilis subsp. saccharophila).

Στην περίπτωση, αυτή, ο μηχανισμός της αλκοολικής ζύμωσης είναι διαφορετικός.

Επίσης, τα ετεροζυμωτικά οξυγαλακτικά βακτήρια μπορούν να παράξουν μικρές ποσότητες αιθανόλης.

Δείτε: Ομοιοζυμωτικά και Ετεροζυμωτικά οξυγαλακτικά βακτήρια

Όμως, αυτή, η αλκοόλη θεωρείται ως ένα παράπλευρο προϊόν, της γαλακτικής ζύμωσης.

Αλκοολική Ζύμωση – Η 2η ζύμωση η οποία μάς ενδιαφέρει
Σε καταστάσεις όπως έλλειψη οξυγόνου αλλά και υπερβολική συσσώρευση NADH, ή περιορισμένη δραστηριότητα της αλκοολικής αφυδρογονάσης, ή υψηλή περιεκτικότητα σε σάκχαρα / οσμωτικό στρες, οι ζυμομύκητες δεν μπορούν να οξειδώσουν όλο το NADH με τη μείωση της ακεταλδεΰδης σε αιθανόλη. Τότε, ενεργοποιείται εναλλακτική αναγωγική οδός της ΄΄γλυκερο-πυρουβικής΄΄ ζύμωσης και η αναγέννηση του  NAD⁺ γίνεται μέσω σχηματισμού γλυκερόλης. Αλκοολική ζύμωση και απόκλιση από την καθαρά αλκοολική προς την γλυκερο-πυρουβική ζύμωση. Μαύρη γραμμή: μεταβολική οδός της αλκοολικής ζύμωσης. Κόκκινη γραμμή: μεταβολική οδός της γλυκερο-πυρουβική ζύμωσης. Κίτρινο πλαίσιο: ενδιάμεσοι μεταβολίτες, οι οποίοι εμπλέκονται στην αλκοολική ζύμωση.

Πάντως, η εξέλιξη, της γενετικής μηχανικής, έχει δώσει την δυνατότητα σε διάφορα Είδη βακτηρίων, αλλά, και μυκήτων (fungi), να εμπλέκονται στην αλκοολική ζύμωση.

Ποιά είναι η σημασία της αλκοολικής ζύμωσης στα γαλακτοκομικά προϊόντα

Εκτός από την αιθανόλη, πολλές άλλες ενώσεις παράγονται κατά τη διάρκεια της αλκοολικής ζύμωσης.

Τέτοιες ενώσεις είναι οι ανώτερες αλκοόλες, οι εστέρες, η γλυκερόλη, το ηλεκτρικό οξύ, το οξικό οξύ, η ακεταλδεΰδη, το διακετύλιο, η ακετοΐνη και η 2,3-βουτανοδιόλη.

Αυτά, τα παράπλευρα προϊόντα συμβάλλουν στα οργανοληπτικά χαρακτηριστικά του τελικού προϊόντος.

Η προώθηση, της αλκοολικής ζύμωσης, θα οδηγήσει σε σημαντική αύξηση του πληθυσμού των ζυμομυκήτων.

Να θυμόμαστε ότι, ένας υψηλός πληθυσμός ζυμομυκήτων, στα γαλακτοκομικά προϊόντα, μπορεί, μέσω της αυξημένης λιπόλυσης και πρωτεόλυσης να συμβάλλει στο flavor, του τελικού προϊόντος.

Δείτε: Ζυμομύκητες – Η αφανής δύναμη στα γαλακτοκομικά προϊόντα

Σφράγισα τα δοχεία, ώστε μέσω της δημιουργίας αναερόβιων συνθηκών, να επιτύχω τον σχηματισμό κάποιας μικρής ποσότητας αλκοόλης στο ζυμωμένο μου γάλα. Πράγματι, στο ζυμωμένο μου γάλα δημιουργήθηκε κάποια ποσότητα αιθανόλης 1% η οποία ενισχύει το flavor του προϊόντος. Τί γίνεται όταν παύσει πλέον αυτό το δοχείο να είναι σφραγισμένο? Δηλαδή, όταν από αναερόβιες συνθήκες αρχίζουν να επικρατούν αερόβιες συνθήκες? Τότε, η αιθανόλη θα μεταβολισθεί σε ακεταλδεΰδη με τη βοήθεια του ενζύμου αλκοολική αφυδρογονάση [alcohol dehydrogenase (ADH)]. Στην συνέχεια, η ακεταλδεΰδη θα μετατραπεί σε οξικό οξύ με τη βοήθεια του ενζύμου αλδεϋδική αφυδρογονάση [aldehyde dehydrogenase (ALDH)]. Τελικά η αιθανόλη θα μεταβολισθεί σε οξικό οξύ και το flavor του προϊόντος θα μεταβληθεί. 
Αλκοολική ζύμωση στα γαλακτοκομικά προϊόντα – Τί να θυμάμαι 

Η αλκοολική σύμωση είναι μια αναερόβια μεταβολική διαδικασία, κατά την οποία οι ζυμομύκητες (όπως Saccharomyces cerevisiae, Candida kefir, Kluyveromyces marxianus, κ.α.) μετατρέπουν τα σάκχαρα τα οποία με τον ένα ή τον άλλο τρόπο μπορούν να βρεθούν στο γάλα (π.χ. γλυκόζη, φρουκτόζη, λακτόζη), σε αιθανόλη (αλκοόλη) και διοξείδιο του άνθρακα (CO₂).

Τα οξυγαλακτικά βακτήρια, υπό ορισμένες συνθήκες μπορούν να παράγουν μικροποσότητες αιθανόλης, είτε μέσω της ετεροζυμωτικής οξυγαλακτικής ζύμωσης είτε μέσω της ζύμωσης του μυρμηκικού οξέος (mixed acid fermentation).

Επίσης, ορισμένα βακτήρια (όπως Zymomonas mobilis, Pseudomonas saccharophila) επιτελούν αλκοολική ζύμωση (μεταβολική οδός Entner–Doudoroff) αλλά αυτά τα βακτήρια δεν απαντώνται στα γαλακτοκομικά προϊόντα.

Δείτε περισσότερα:

Whey utilization in preparation of alcoholic beverage. Choudhari, D.M. (2010). Ph.D. Thesis, Mahatma Phule Krishi Vidyapeeth, Rahuri, AHMEDNAGAR, M.S. (India).

The microbiology of alcoholic beverages. Fleet, G. (1998). In: Microbiology of Fermented Foods.  B.J.B. Wood (ed.). pp. 217–262. London: Blackie Academic Professional

Effect of natural starter culture activity on ethanol content in fermented dairy products. Zalsek, K. and Gorsek, A. (2010),. International Journal of Dairy Technology, 63: 113-118.

Yeast and biochemistry of ethanol fermentation. Boulton, R.B., Singleton, V.L., Bisson, L.F., & Kunkee, R.E. (1996). In: Principles and Practices of Winemaking (pp. 139–172). R.B. Boulton (Ed.). New York: Chapman & Hall

 

 

 

 

Facebook Comments

Αφήστε μια απάντηση

Η ηλ. διεύθυνση σας δεν δημοσιεύεται. Τα υποχρεωτικά πεδία σημειώνονται με *